实用药物与临床

2020, v.23(08) 673-678

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miR-17-5p和MMP2在百草枯致肺上皮-间质转化中的机制研究
Mechanism of miR-17-5p and MMP2 in paraquat-induced epithelial-mesenchymal transition

贾茹珺;李铁刚;

摘要(Abstract):

目的揭示miR-17-5p和MMP2在百草枯(Paraquat,PQ)中毒所致的肺上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用。方法构建PQ中毒致肺EMT的细胞模型(A549细胞),经15、30、60μmol/L的PQ染毒6 d,采用Western blot或qRT-PCR检测模型中EMT相关基因E-钙黏附蛋白(Epithelia cadherin,E-cadherin)和α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达情况。采用Western blot或qRT-PCR检测模型中基质金属蛋白酶2(Matrix metalloproteinase 2,MMP2)、miR-17-5p的表达情况,通过转染miR-17-5p的类似物(mimic)或抑制剂(inhibitor)来研究miR-17-5p对MMP2的调控作用。结果 Western blot结果显示,E-cadherin在30μmol/L PQ染毒组表达下调(P=0.018),在60μmol/L PQ染毒组下调更明显(P=0.009);α-SMA在30μmol/L PQ染毒组α-SMA表达上调(P=0.037),在60μmol/L PQ染毒组上调更明显(P=0.008);MMP2在30μmol/L PQ染毒组MMP2表达上调(P=0.016),在60μmol/L PQ染毒组上调更明显(P=0.007)。qRT-PCR结果显示,E-cadherin在30μmol/L PQ染毒组表达下调(P=0.010),在60μmol/L PQ染毒组下调更明显(P<0.001);α-SMA在30μmol/L PQ染毒组表达上调(P=0.003),在60μmol/L PQ染毒组上调更明显(P<0.001);MMP2在30μmol/L PQ染毒组表达上调(P=0.004),在60μmol/L PQ染毒组上调更明显(P=0.002)。qRT-PCR结果提示,30μmol/L PQ染毒组miR-17-5p表达下调(P=0.010),60μmol/L PQ染毒组miR-17-5p表达下调更明显(P=0.001)。mimic作用后MMP2表达下调(P=0.002),而inhibitor作用后MMP2表达上调(P=0.005)。结论 MMP2可作为miR-17-5p靶基因,其表达受miR-17-5p调控,其相互作用参与PQ致肺EMT的过程中。

关键词(KeyWords): 百草枯;肺纤维化;上皮间质转化;miR-17-5p;MMP2

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金面上项目(81772056);; 辽宁省自然科学基金(20170541056);; 中国医科大学附属盛京医院杰出人才基金(MF89)

作者(Author): 贾茹珺;李铁刚;

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DOI:

参考文献(References):

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